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新买的液氮罐需要清洗吗?

时间:2019-04-10 16:14来源: 作者:班德液氮罐 点击:
在生物样本储存、医疗科研等对洁净度要求严苛的场景中,新买液氮罐的清洗是确保样本安全的关键前置步骤。即使厂家已进行初步清洁,仍需根据使用场景决定是否深度清洗,具体操作规范如下:

一、清洗必要性判断

(一)必须清洗的场景

  1. 生物样本储存(胚胎 / 细胞):生产过程中可能残留油渍、金属碎屑,污染物可能引发样本细胞膜损伤。
  2. 医疗临床用途(干细胞移植):运输过程中易附着灰尘颗粒,微生物污染会导致样本活性下降。
  3. 高纯液氮储存(半导体行业):加工时可能残留润滑剂,杂质会影响液氮纯度(达 ppm 级要求)。

(二)可简化清洗的场景

  • 普通工业用途(如金属冷处理):目视检查无明显污渍后,用干燥氮气吹扫内壁去除浮尘即可。
  • 短期临时存储(<72 小时):重点用 75% 酒精擦拭颈管内壁等接触样本区域。

二、专业清洗流程(生物医疗级标准)

(一)预处理阶段(开箱后 24 小时内)

  1. 检查罐体编号与合格证是否一致,确认真空度检测报告(合格真空度应≤10^-3Pa),目视内壁是否有明显油污、焊渣等杂质(直径>0.5mm 的颗粒需清除)。
  2. 准备工具:注射用水(WFI 级)或 0.1% 氢氧化钠溶液(去油脂)、软毛尼龙刷(避免划伤内胆)、蠕动泵(控制流量 50-100mL/min),以及尘埃粒子计数器、ATP 荧光检测仪等检测设备。

(二)分步清洗操作(共 4 小时)

阶段 1:初洗去重污(60 分钟)

注入 37℃温注射用水(液面达罐体 1/3),用蠕动泵循环冲洗内壁,重点冲刷颈管螺纹处(易残留加工润滑剂),排水后用白色绸布擦拭,直至无可见污染物。

阶段 2:化学清洗(90 分钟)

  • 生物样本罐:配置 0.1% 磷酸缓冲盐溶液(PBS),循环泵打循环 30 分钟,中和残留碱性物质。
  • 工业罐:用 5% 碳酸氢钠溶液浸泡 2 小时,去除焊接残留的助焊剂(温度控制 25±2℃)。

阶段 3:纯化水精洗(90 分钟)

用三级过滤纯化水(电导率≤1.3μS/cm)进行 3 次脉冲式冲洗(每次注水 - 排空间隔 10 分钟),最后用无菌氮气(露点≤-40℃)吹扫内壁,直至湿度<5% RH。

(三)灭菌与检测

  1. 灭菌处理
    • 可拆卸部件(如样本架、颈塞)用 121℃高压灭菌 15 分钟;整罐用过氧化氢气体灭菌(浓度 600ppm,作用 2 小时),避免甲醛熏蒸残留风险。
  2. 洁净度检测
    • 尘埃粒子:每立方米≥0.5μm 的粒子数≤10000 个(ISO 8 级洁净度)。
    • 微生物残留:ATP 荧光值<100RLU,相当于每平方厘米菌落数<5CFU。

三、禁用操作与风险提示

(一)禁止行为

  1. 不可使用钢丝球 / 金属刷,以免划伤内壁(深度>50μm 的划痕易滋生微生物)。
  2. 严禁高温烘干(超过 50℃会破坏真空层吸附剂,影响绝热性能)。
  3. 75% 酒精仅可用于颈管外壁消毒,不可直接冲洗内壁(避免残留醇类物质影响样本)。
  4. 内壁未干燥时不可注液氮,残留水分结冰会损伤冻存管。
  5. 不可省略尘埃粒子检测,肉眼不可见的 0.3μm 颗??赡芏氯炒婀芡钙?。

(二)特殊材质处理

  • 铝合金内胆罐:禁用含氯离子清洁剂(如氯化钠溶液),防止点蚀(腐蚀速率>0.1mm / 年)。
  • 不锈钢 316L 内胆罐:清洗后需用 20% 硝酸溶液浸泡 30 分钟进行钝化处理,增强抗腐蚀性。

四、厂家建议与异常处理

(一)遵循原厂指南

查阅《产品使用手册》中 “首次使用准备” 章节,部分进口品牌要求生物级罐体必须用 USP 级纯化水清洗,真空层接触水分需立即用氮气吹扫(间隔<10 分钟)。

(二)异常情况处理

  1. 内壁生锈:轻度锈斑(直径<2mm)用 0.5% 柠檬酸溶液擦拭后冲洗;重度锈蚀(面积>5cm2)需联系厂家更换内胆(锈蚀会导致液氮纯度下降 10ppm 以上)。
  2. 包装破损污染:若运输中包装进水 / 进尘,需增加臭氧灭菌(浓度 0.3mg/m3,作用 4 小时)。

五、清洗效果验证

  • 目视检查:用 500L 强光手电照射,30cm 距离内无可见颗粒、油渍、水痕。
  • 水分残留:用湿度试纸检测,内壁干燥无冷凝(蓝色试纸不变色)。
  • 尘埃粒子:激光计数器连续 3 次检测,≥0.5μm 粒子均值<10000 个 /m3。
  • 微生物残留:ATP 荧光检测仪检测 3 个点,数值均<100RLU。

六、清洗决策总结

新买液氮罐的清洗需根据用途决定:


 用于生物医疗或高纯场景时,必须执行灭菌级清洗(分初洗、化学清洗、纯化水精洗三阶段),并通过洁净度检测。

  • 普通工业场景可简化清洁,重点吹扫或擦拭颈管区域。
    首次清洗后需建立《设备清洗日志》,记录清洗时间、试剂及检测结果,建议每 6 个月重复全面清洗一次。


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